大口徑液氮罐保存胚胎和細胞等樣品

細胞和胚胎是生物學(xué)實(shí)驗中需要大量的超低溫冷藏的樣品，常規的方法有深冷冰箱儲存法，但是壓縮機不知什么時(shí)候會(huì )罷工。所以，采用液氮罐的液氮超低溫儲存方法，就成了業(yè)內使用為廣泛的方法和技術(shù)。今天，就給您說(shuō)說(shuō)幾個(gè)關(guān)于液氮罐保存細胞和胚胎的知識點(diǎn)。液氮罐

一、在細胞培養過(guò)程中的使用 細胞培養的一般過(guò)程，主要包括準備、取材、培養和凍存復蘇4步。為保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般用一196℃液氮溫度，將細胞收集至凍存管中加入含保護劑(一般為二甲基亞砜或甘油)的培養基，以一定的冷卻速度凍存，最終保存于液氮中。在極低的溫度下，細胞保存的時(shí)間幾乎是無(wú)限的。目前美國標準細胞庫或細胞銀行(ATCC)液氮凍存有3200個(gè)已經(jīng)過(guò)鑒定的細胞系(1992)，其中包括來(lái)自正常人和各種疾病患者的皮膚成纖維細胞系和來(lái)自不同物種的近75個(gè)雜交瘤細胞株。

二、胚胎冷凍保存技術(shù) 胚胎冷凍保存技術(shù)是指在低溫條件下利用低溫保護劑保存胚胎的一門(mén)技術(shù)。這一技術(shù)是20世紀后半葉隨著(zhù)人工授精技術(shù)廣泛應用而產(chǎn)生的，目前已成為了現代生命科學(xué)研究必備的手段之一。動(dòng)物胚胎的冷凍保存原理就是因為低溫降低了胚胎內的變質(zhì)反應速度，溫度越低，胚胎保存時(shí)間就越長(cháng)。目前已研究出多種胚胎冷凍保存方法，包括慢速冷凍法、快速冷凍法、一步冷凍法、直接移植冷凍法和玻璃化冷凍法等。

其中玻璃化冷凍法的步驟如下：

①將胚胎在室溫下放人25%玻璃化溶液(VS液)中預處理15min;

②將預處理后的胚胎放在高濃度(75%一90%)的VS液中保存20—40min;

③將經(jīng)過(guò)兩步抗凍劑處理的胚胎直接投入液氮中保存。

此外還可以用液氮罐保存菌種、疫苗、骨組織、精子等物質(zhì)，均可達到很好的長(cháng)期存儲的效果。

常用胚胎和細胞保存液氮罐為大口徑液氮罐，且好里面配多層凍存管提籃，用來(lái)保存細胞等樣品。大型液氮罐一罐可保存七八千只凍存管，對于細胞保存，也是一個(gè)超大的容器。